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Team:Paris/25 August 2009
From 2009.igem.org
NoteBook
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Lab work
Digestion/Gel purification w/ Soufifi
Digestion of OmpA Linker by SacI and Spe I
Digestion of Ompa Signal by the same enzymes
A41 OmpAsignal
PCR OmpAsignal A41 ; 70,4° ; 9s ; matrice:pINK2
Gel purif
A41 OmpAsignal A40 TolRII
Digestion X/P
Ligation pSB1A3
A41 OmpAsignal ligation topovector
PCR+ check + purification
PCR->A34 (NTER ClyA)
Check gel--> OK
Purification-->ok
Miniprep+Sequencing
Miniprep of all colonie of nter RFP and Cter RFP
Colonie DO:
Nter RFP: for colonie
-1:1,80µg/ml
(Miniprep: 3,33µL+ oligos VF2(1/50): 2,45µL+ H20: 9,22µL)
(Miniprep: 3,33µL+ oligos VR(1/50): 2,45µL+ H20: 9,22µL)
-2:1,90µg/ml
(Miniprep: 3,16µL+ oligos VF2(1/50): 2,45µL+ H20: 9,39µL)
(Miniprep: 3,16µL+ oligos VR(1/50): 2,45µL+ H20: 9,39µL)
-3:1,65µg/ml
(Miniprep: 3,64µL+ oligos VF2(1/50): 2,45µL+ H20: 8,81µL)
(Miniprep: 3,64µL+ oligos VR(1/50): 2,45µL+ H20: 8,81µL)
-4:1,66µg/ml
(Miniprep: 3,61µL+ oligos VF2(1/50): 2,45µL+ H20: 8,94µL)
(Miniprep: 3,61µL+ oligos VR(1/50): 2,45µL+ H20: 8,94µL)
Cter RFP: for colonie
-1:1,80µg/ml
-2:1,90µg/ml
-3:1,70µg/ml
-4:1,60µg/ml
