Team:Chiba/Project
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=== Characterization of LuxR Mutant === | === Characterization of LuxR Mutant === | ||
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[[Image:Chiba-LuxRs characterization.png|frame|right|Fig. Characterization of LuxR Mutants]] | [[Image:Chiba-LuxRs characterization.png|frame|right|Fig. Characterization of LuxR Mutants]] | ||
+ | #LuxR WT, Mutant(13種)とpLux-GFPのプラスミドが2つトランスフォーメーションされたJW1226株を12h@37℃液体培養。 | ||
+ | #Cultureを48ピンでNCフィルタへ植菌し、フィルタを固体培地にのせて12h@37℃で培養。 | ||
+ | #AHLの濃度を0, 1, 10, 100, 1000 nMでふった固体培地に、NCフィルタを移動。 | ||
+ | #この時を測定開始点とし、30分毎に4時間蛍光の上がり方を目視で確認。 | ||
- | + | ==== 100 nM培地での応答の遅れについての結果 ==== | |
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- | + | ==== AHL濃度を振った場合の、6h後の蛍光強度の差についての結果==== | |
- | + | ==== LuxR Mutantの個性と、変位が入っている部分からの考察==== | |
=== Demonstration === | === Demonstration === |
Revision as of 08:56, 21 October 2009
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IntroductionImplementing a "Timer" Function!
Project Design(手術予定) 2) Project Design ⑤Receiver側のAHL通信の仕組みを図説する。(1,AHLが入るところ(培地調節) 2,Receiver中のLuxR 3,Receiver中のReporter)
Experiments, Results & DiscussionLuxR mutantづくり
Experiments
(手術予定) ⑥Mutantを創る。(Error-proneが良い理由:バリエーションを創りやすい。新たなBiobrick作成方法としてError-prone PCRとスクリーニングをセットにしMutant-Partsの作り方を説明する。) ⑦さらに詳しい実験方法(Biobrickからerror-prone PCRをおこなったことなど) ⑧得られたデーター(なぜ8000のライブラリを、200に絞り、どうやって13sampleを選び出したのか説明) Characterization of LuxR MutantExperiments
100 nM培地での応答の遅れについての結果AHL濃度を振った場合の、6h後の蛍光強度の差についての結果LuxR Mutantの個性と、変位が入っている部分からの考察Demonstration⑯E. coli Timer完成デモ 明日のよるにはあげられます。--Yoshimi 14:21, 20 October 2009 (UTC)
Conclusions
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