Team:Groningen/Notebook/30 July 2009
From 2009.igem.org
Wet
GVP Cluster
Transporters
GlpF
Redone PCR3
25uL | Phusion |
2 uL | GlpF Fw |
2 uL | GlpF Rev |
0.5 uL | GlpF PCR3 (28/07/09) DNA |
21uL | MQ |
The resulting PCR product was purified using a PCR purification kit of Roche. concentration was measured using Nanodrop;
16,0 ng/ul | GlpFPCR3 30/07 |
36.4 ng/ul | psB1AC3-M digested |
32.0 ng/uL | GlpF digested |
Restiction was done on the GlpF PCR3 (30/07) with XbaI and PstI as noted on the notebook of 28/07/09 The resticted GlpF PCR3 (30/07) was ligated with psB1AC3 resticted with EcoRI and SpeI.
Ligation mix:
2.0 uL | T4 Ligase buffer | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
0.5 uL | T4 Ligase | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
11.25 uL | GlpF PCR3 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Metal AccumulationVectorsResults were disappointing, no colonies on plate. Hope the fresh ligase and ligase buffer (10x) will help the new ligation that was started. New vectors were cut and purified from gel.DryWe worked on migrating graphs from Google spreadsheets to Wiki tables, making sure that at least the raw data used to generate the graphs is "safe".
|