Team:Chiba/Project/characterization

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実験の具体的操作
 
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まず、LuxR Mutantsとpositive controlとしてLuxR WT, negative control としてレポーターが含まれない菌をそれぞれグリストからつつき、12h@37℃液体培養。
 
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・pC1A3-LuxR Mutants / pLux-GFP @JW1262 : Sample No.1~11, L1, L2
 
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・pC1A3-LuxR WT / pLux-GFP @JW1262 : Positive control
 
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・GFP等のレポーターが入っていない菌 : Negative control
 
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*Negative controlとして, gfpなしは不適切ではないでしょうか。--[[User:Masahiro|Masahiro]] 18:58, 20 October 2009 (UTC)
 
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*ていう指摘がこのまえのミーティングででましたね,luxRwtがcontrolになってるので,gfpは除いてokです。--[[User:Maiko|Maiko]] 23:47, 20 October 2009 (UTC)
 
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次にCultureを48ピンでNCフィルタへ植菌し、フィルタを固体培地にのせて12h@37℃で培養。
 
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最後にAHLの濃度を0, 1, 10, 100, 1000 nMで(一番最初の9月22日の実験は0, 10, 1000 nMでおこないました。)ふった固体培地に、NCフィルタを移動。
 
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この時を測定開始点とし、30分毎に4時間蛍光の上がり方を目視で確認。
 

Latest revision as of 08:52, 21 October 2009