Team:Osaka/Meeting

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From Notebook

2009/08/01

2009/08/02

Competent　cellの作り方

  1. あらかじめ菌を培養しておく。
  2. Single colonyを試験管にとり、5mlのLBを加える。
  3. 37度で一晩おく。（over night→o/n)
  4. 大量に菌が得られたら、40ml LBを入れた三角フラスコに菌にいれて37度で約２時間Incubate。
  5. 分光光度計でOD=0.3になるまでIncubate。
  6. 三角フラスコをOn ice 10min (常に道具は冷やした状態をこころがける）
  7. 遠心分離管（J.20、サイズに注意、冷やしておく）に20mlずつ分注。はかりで測って重さを均一にする。
  8. 8krpm,3℃、roter ID 20、５min で遠心分離。
  9. 上澄みをデカンテーション。
  10. 0.1M MgCl2溶液
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