Team:Osaka/Meeting
From 2009.igem.org
2009/08/02
Competent cellの作り方
- あらかじめ菌を培養しておく。
- Single colonyを試験管にとり、5mlのLBを加える。
- 37度で一晩おく。(over night→o/n)
- 大量に菌が得られたら、40ml LBを入れた三角フラスコに菌にいれて37度で約2時間Incubate。
- 分光光度計でOD=0.3になるまでIncubate。
- 三角フラスコをOn ice 10min (常に道具は冷やした状態をこころがける)
- 遠心分離管(J.20、サイズに注意、冷やしておく)に20mlずつ分注。はかりで測って重さを均一にする。
- 8krpm,3℃、roter ID 20、5min で遠心分離。
- 上澄みをデカンテーション。
- 0.1M