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Team:Osaka/Meeting
From 2009.igem.org
2009/08/02
Competent cellの作り方
- あらかじめ菌を培養しておく。
- Single colonyを試験管にとり、5mlのLBを加える。
- 37度で一晩おく。（over night→o/n)
- 大量に菌が得られたら、40ml LBを入れた三角フラスコに菌にいれて37度で約２時間Incubate。
- 分光光度計でOD=0.3になるまでIncubate。
- 三角フラスコをOn ice 10min (常に道具は冷やした状態をこころがける）
- 遠心分離管（J.20、サイズに注意、冷やしておく）に20mlずつ分注。はかりで測って重さを均一にする。
- 8krpm,3℃、roter ID 20、５min で遠心分離。
- 上澄みをデカンテーション。
- 0.1M MgCl2溶液
