ULB/11 September 2009
From 2009.igem.org
Système 1 Repiquage des colonies et analyse au microscope. Préparer les tubes pour le séquençage (40µl) : - hfsG - hfsH - H + Ter - G + H + Ter - Promoteur + RBS + RFP - PRR + GHT - ccdA I - ccdA F Y a-t-il oui ou non du lactose dans le milieu de culture LB ?
Système 3 Extraction des plasmides des tubes 4 et 5. Digestion et ligation des briques du Quorum Sensing (système 3A). Trouver un plasmide qu’on a en stock avec une ORI différente et mettre en place le syst ème 3B. Est-il possible de thermoporer 2 plasmides en même temps ? Faisable selon Gilles.
Système 2 Repiquage des ligations 9-10.
Faire les ligations tubes 4 (K14...) avec tube 7 (GFP) afin de tester si c2P22 réprime bien K14...
Pour changer de milieu de culture : centrifuger les bactéries, laver avec du milieu LB, centrifuger à nouveau et ensuite mettre le nouveau milieu de culture.