Team:Paris/Production testing

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(Difference between revisions)
(→Part I : Testing delay phase I)
(→Part I : Testing delay phase I)
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|bgcolor="#E0E3FE"|'''PCR :'''
|bgcolor="#E0E3FE"|'''PCR :'''
|bgcolor="#CBD1FD"|'''PCR :'''
|bgcolor="#CBD1FD"|'''PCR :'''
-
|'''PCR :'''
+
|bgcolor="#BCCDFD"'''PCR :'''
|- style="background: #d8d8d8; text-align: center;"
|- style="background: #d8d8d8; text-align: center;"
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-
-
-
|'''Verification on gel :'''
+
|bgcolor="#BCCDFD"'''Verification on gel :'''
-
-
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-
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-
|'''Purification on gel :'''
+
|bgcolor="#BCCDFD"'''Purification on gel :'''
-
-
Line 154: Line 154:
|bgcolor="#E0E3FE"|'''digestion:'''  
|bgcolor="#E0E3FE"|'''digestion:'''  
|bgcolor="#CBD1FD"|'''digestion:'''  
|bgcolor="#CBD1FD"|'''digestion:'''  
-
|'''digestion:'''  
+
|bgcolor="#BCCDFD"'''digestion:'''  
|- style="background: #bebebe; text-align: center;"   
|- style="background: #bebebe; text-align: center;"   
Line 168: Line 168:
-
-
-
|'''verification digestion:'''
+
|bgcolor="#BCCDFD"'''verification digestion:'''
-
-
Line 180: Line 180:
|bgcolor="#E0E3FE"|'''ligation:'''  
|bgcolor="#E0E3FE"|'''ligation:'''  
|bgcolor="#CBD1FD"|'''ligation:'''  
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-
|'''ligation:'''  
+
|bgcolor="#BCCDFD"'''ligation:'''  
|- style="background: #bebebe; text-align: center;"   
|- style="background: #bebebe; text-align: center;"   
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-
-
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|'''PCR colo :'''
+
|bgcolor="#BCCDFD"'''PCR colo :'''
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|'''miniprep:'''
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|bgcolor="#BCCDFD"'''miniprep:'''
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-
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|'''sequencing :'''
+
|bgcolor="#BCCDFD"'''sequencing :'''
-
-

Revision as of 18:38, 21 October 2009

iGEM > Paris > WetLab > Production


Contents

WetLab - Production

  1. The delay
    1. Part I : Testing delay phase I
    2. Part I : Functional testing of the part I
    3. Part II : Testing delay phase II
    4. Part II : Functional testing of the part II
  2. The destabilization of the membrane

The delay

We separate the construction on two plasmids : Part I and Part II.

Part I : Testing delay phase I

plasmid = PSB3T5



Time required : A lOT !!!!!

Experiments ran :


column 1 column 2 column 3 column 4


PCR :

TatABCE matrix :

PCR : PCR : bgcolor="#BCCDFD"PCR :
Verification on gel :

ok

Verification on gel :

-

Verification on gel :

-

bgcolor="#BCCDFD"Verification on gel :

-

Purification on gel :

ok

Purification on gel :

-

Purification on gel :

-

bgcolor="#BCCDFD"Purification on gel :

-


digestion:

TatABCE

digestion: digestion: bgcolor="#BCCDFD"digestion:
verification digestion:

ok

verification digestion:

-

verification digestion:

-

bgcolor="#BCCDFD"verification digestion:

-


ligation:

TatABCE

ligation: ligation: bgcolor="#BCCDFD"ligation:
PCR colo :

ok

PCR colo :

-

PCR colo :

-

bgcolor="#BCCDFD"PCR colo :

-

miniprep:

STOPPED

miniprep:

-

miniprep:

-

bgcolor="#BCCDFD"miniprep:

-

sequencing :

-

sequencing :

-

sequencing :

-

bgcolor="#BCCDFD"sequencing :

-

Part I : Functional testing of the part I

PBAD LacI LVA- YFP was transforme into Top ten Bacteria and grew on medium :


1% arabinose

1% glucose

LB pure


Part II : Testing delay phase II

plasmid =


Time required : A lOT !!!!!

Experiments ran :

column 1 column 2 column 3 column 4


PCR :

TatABCE matrix :

PCR : PCR : PCR :
Verification on gel :

ok

Verification on gel :

-

Verification on gel :

-

Verification on gel :

-

Purification on gel :

ok

Purification on gel :

-

Purification on gel :

-

Purification on gel :

-


digestion:

TatABCE

digestion: digestion: digestion:
verification digestion:

ok

verification digestion:

-

verification digestion:

-

verification digestion:

-


ligation:

TatABCE

ligation: ligation: ligation:
PCR colo :

ok

PCR colo :

-

PCR colo :

-

PCR colo :

-

miniprep:

STOPPED

miniprep:

-

miniprep:

-

miniprep:

-

sequencing :

-

sequencing :

-

sequencing :

-

sequencing :

-

Part II : Functional testing of the part II

Ptet RFP Plac TetR was tranforme into Top10 bacteria and grew on media :


0,1% IPTG .

1% glucose.

LB pure.



The destabilization of the membrane

plasmid = PSB3T5






Time required : A lOT !!!!!


Experiments ran :

row 1 row 2 row 3
PCR :



PCR : PCR :


Verification on gel :

ok

Verification on gel :

ok

Verification on gel :

ok

Purification on gel :

ok

Purification on gel :

ok

Purification on gel :

ok


digestion:



digestion: digestion:
verification digestion:

ok

verification digestion:

ok

verification digestion:

ok


ligation:


ligation: ligation:


PCR colo :

ok

PCR colo :

ok

PCR colo :

ok


miniprep:

clone :

miniprep:

clone :

miniprep:

clone :


sequencing :

ok

sequencing :

ok

sequencing :

ok


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