Team:Paris/Addressing testing

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(Difference between revisions)
(Adressing system)
(Adressing system)
Line 38: Line 38:
|- style="background: #bebebe; text-align: center;"
|- style="background: #bebebe; text-align: center;"
-
|PCR :
+
|PCR : ClyA Cterm  plasmid : ? Oligo :  TM :
 +
ClyA Nterm  plasmid : ? Oligo :  TM :
 +
mRFP Cterm  plasmid : ? Oligo :  TM :
 +
mRFP Nterm  plasmid : ? Oligo :  TM :
 +
 
|PCR :
|PCR :
|PCR :
|PCR :
Line 97: Line 101:
-
ClyA Cterm  plasmid : ? Oligo :  TM :
 
-
ClyA Nterm  plasmid : ? Oligo :  TM :
 
-
mRFP Cterm  plasmid : ? Oligo :  TM :
 
-
mRFP Nterm  plasmid : ? Oligo :  TM :
 

Revision as of 11:35, 17 October 2009

iGEM > Paris > WetLab > Addressing

WetLab

Main - Addressing - Production - reception -
Addressing


Adressing system

global constructions :


plasmid = PSB3T5


Time required : A lOT !!!!!



Experiments ran :

row 1 row 2 row 3
PCR : ClyA Cterm plasmid : ? Oligo : TM :

ClyA Nterm plasmid : ? Oligo : TM : mRFP Cterm plasmid : ? Oligo : TM : mRFP Nterm plasmid : ? Oligo : TM :

PCR : PCR :


Verification on gel : Verification on gel : Verification on gel :


Purification on gel : Purification on gel : Purification on gel :
digestion: digestion: digestion:
verification digestion: verification digestion: verification digestion:


ligation: ligation: ligation:


PCR colo : PCR colo : PCR colo :
miniprep: miniprep: miniprep:


sequencing : sequencing : sequencing :


From plate: mRFP


PCR :



Verification on gel

ok

Purification on gel

ok

digestion:

ClyA Cterm S/P RFP Nterm X/P PBAD E/S

verification digestion:


ligation:

ClyA Cter-RFP Nter vector PSB1A3

PCR colo :

miniprep:

verifivation of the miniprep by digestion

sequencing [[ClyA]]

-ClyA Nterm= biobrick+sequencage+stock glycerol Done

-ClyA Cterm= biobrick+sequencage+stock glycerol Done

[[-RFP-]]

-RFP Nterm= biobrick+sequencage+stock glycerol Done

-RFP Cterm= biobrick+sequencage+stock glycerol Done

[[-ClyA Cter-RFP Nter-]]

-ClyA Cter-RFP Nter= biobrick+stock glycerol Done

[[-RFP Cter-ClyA Nter-]]

-miss ligation between 2 parts (j'ai fait plusieurs ligation le 7ou8/09, mais pas marché le 9/09 apres culture overnight, voir si les autres ont continué)


[[PBad-ClyA Cter-RFP Nter-]]

-failed many time with:

Pbad cut in S/P and ClyA Cter-RFP Nter in X/P

Pbad cut in E/S and ClyA Cter-RFP Nter in E/X


Export system

Production of protein of interest



Production of protein of interest