Team:Paris/Addressing testing

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(Difference between revisions)
(Adressing system)
(Adressing system)
Line 123: Line 123:
|'''ligation:'''  
|'''ligation:'''  
-
PBAD  vector : ? E/S  ClyA Cter-RFP Nter vector PSB1A3E/X (x2)  
+
PBAD  E/S  ClyA Cter-RFP Nter vector PSB1A3 E/X (x2)  
-
PBAD  vector : ? S/P  ClyA Cter-RFP Nter X/P (x2)
+
PBAD  S/P  ClyA Cter-RFP Nter vector PS  X/P (x2)
|'''ligation:'''  
|'''ligation:'''  

Revision as of 12:13, 17 October 2009

iGEM > Paris > WetLab > Addressing

WetLab

Main - Addressing - Production - reception -
Addressing


Adressing system

global constructions :


plasmid = PSB3T5


Time required : A lOT !!!!!



Experiments ran :

row 1 row 2 row 3
PCR :

ClyA Cterm matrix : ? Oligo : TM :

ClyA Nterm matrix : ? Oligo : TM :

mRFP Cterm matrix : ? Oligo : TM :

mRFP Nterm plasmid : ? Oligo : TM :


PCR :

-

PCR :

-

Verification on gel :

ok

Verification on gel :

-

Verification on gel :

-

Purification on gel :

ok

Purification on gel :

-

Purification on gel :

-


digestion:

ClyA Cterm S/P

RFP Nterm X/P

PBAD vector : ? E/S


digestion:

ClyA Cter-RFP Nter vector PSB1A3 E/X

digestion:

-

verification digestion:

ok

verification digestion:

ok

verification digestion:

-


ligation:

ClyA Cter-RFP Nter vector PSB1A3

ligation:

PBAD E/S ClyA Cter-RFP Nter vector PSB1A3 E/X (x2) PBAD S/P ClyA Cter-RFP Nter vector PS X/P (x2)

ligation:


PCR colo :

ok

PCR colo :

ok

PCR colo :

-


miniprep:

clone :

miniprep:

clone :

miniprep:

-


sequencing :

ok

sequencing :

ok

sequencing :

-

stock glycerol:

ok

stock glycerol

ok

stock glycerol

-



Pbad cut in S/P and ClyA Cter-RFP Nter in X/P

Pbad cut in E/S and ClyA Cter-RFP Nter in E/X


Export system

Production of protein of interest



Production of protein of interest


Time required : A lOT !!!!!



Experiments ran :

row 1 row 2 row 3
PCR :



PCR : PCR :


Verification on gel :

ok

Verification on gel :

ok

Verification on gel :

ok

Purification on gel :

ok

Purification on gel :

ok

Purification on gel :

ok


digestion:



digestion: digestion:
verification digestion:

ok

verification digestion:

ok

verification digestion:

ok


ligation:


ligation: ligation:


PCR colo :

ok

PCR colo :

ok

PCR colo :

ok


miniprep:

clone :

miniprep:

clone :

miniprep:

clone :


sequencing :

ok

sequencing :

ok

sequencing :

ok