Team:Paris/Production testing delay

From 2009.igem.org

iGEM > Paris > Production > Testing > delay

Contents

WetLab

Main - Addressing - Production - reception -
Production

Delay

We separate the construction on two plasmids :


Part1 : testing delay phase 1

Part1 : functional testing of the part 1


Part2 : testing delay phase 2

Part2 : functional testing of the part 2


part1

plasmid = PSB3T5



Time required : A lOT !!!!!

Experiments ran :


column 1 column 2 column 3 column 4


PCR :

TatABCE matrix :

PCR : PCR : PCR :
Verification on gel :

ok

Verification on gel :

-

Verification on gel :

-

Verification on gel :

-

Purification on gel :

ok

Purification on gel :

-

Purification on gel :

-

Purification on gel :

-


digestion:

TatABCE

digestion: digestion: digestion:
verification digestion:

ok

verification digestion:

-

verification digestion:

-

verification digestion:

-


ligation:

TatABCE

ligation: ligation: ligation:
PCR colo :

ok

PCR colo :

-

PCR colo :

-

PCR colo :

-

miniprep:

STOPPED

miniprep:

-

miniprep:

-

miniprep:

-

sequencing :

-

sequencing :

-

sequencing :

-

sequencing :

-

functional testing of the part 1

PBAD LacI LVA- YFP was transforme into Top ten Bacteria and grew on medium :


1% arabinose

1% glucose

LB pure


part2

plasmid =


Time required : A lOT !!!!!

Experiments ran :

column 1 column 2 column 3 column 4


PCR :

TatABCE matrix :

PCR : PCR : PCR :
Verification on gel :

ok

Verification on gel :

-

Verification on gel :

-

Verification on gel :

-

Purification on gel :

ok

Purification on gel :

-

Purification on gel :

-

Purification on gel :

-


digestion:

TatABCE

digestion: digestion: digestion:
verification digestion:

ok

verification digestion:

-

verification digestion:

-

verification digestion:

-


ligation:

TatABCE

ligation: ligation: ligation:
PCR colo :

ok

PCR colo :

-

PCR colo :

-

PCR colo :

-

miniprep:

STOPPED

miniprep:

-

miniprep:

-

miniprep:

-

sequencing :

-

sequencing :

-

sequencing :

-

sequencing :

-

functional testing of the part 2

Ptet RFP Plac TetR was tranforme into Top10 bacteria and grew on media :


0,1% IPTG .

1% glucose.

LB pure.


return to the top